【雲回顧】病理研究之細節決定TCR試驗的成敗

1、什麽是TCR？

組織交叉反應（Tissue Cross-Reactivity）是在體(ti) 外檢測抗體(ti) 藥物與(yu) 組織上的抗原表位結合的試驗。目的是確認受試抗體(ti) 與(yu) 藥效靶組織抗原表位的結合，檢測抗體(ti) 是否與(yu) 非靶部位組織抗原結合，為(wei) 確定非臨(lin) 床安全性試驗相關(guan) 動物種屬及預測毒性靶器官提供參考。

2、為什麽要做TCR？

抗體(ti) 藥物具有免疫特性，除了與(yu) 把抗原結合外，如果人體(ti) 正常組織中存在相同或相似的抗原表位，還會(hui) 與(yu) 靶器官外的其他組織細胞結合從(cong) 而產(chan) 生嚴(yan) 重的不良反應。

因此，進行TCR試驗是抗體(ti) 藥物臨(lin) 床前安全性評價(jia) 的重要組成部分，對於(yu) 抗體(ti) 藥物的研發至關(guan) 重要，也是國內(nei) 外監管機構的要求。

3、TCR試驗的核心技術是？

免疫組織化學技術（IHC，immunohistochemistry）。采用冰凍或固定組織標本，切片，並用帶顯色劑標記的特異性抗體(ti) 在組織細胞原位通過抗原抗體(ti) 反應和組織化學的呈色反應對組織染色，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項技術。

4、試驗所需的人體器官組織從哪裏來呢？

捐獻人體(ti) 組織、手術取組織、胎盤組織、細胞係、商業(ye) 化人體(ti) 組織芯片。

5、如何正確的處理新鮮的組織？

將新鮮的組織進行冰凍，不建議使用化學固定法。

冰凍時要注意迅速冷凍，盡量避免緩凍或者反複凍融，會(hui) 在組織中形成冰晶，破壞組織，也給後麵的試驗帶來觀察障礙。

6、如何判斷我的病理切片是否封閉好了？

利用抗轉鐵蛋白受體(ti) 抗體(ti) 對組織進行染色。若組織切片中的血細胞呈淡淡的黃褐色，那麽(me) 表明切片封閉好了。

7、組化染色時何時選擇一步法（直接法）？

一步法是將生物素標記與(yu) 一抗偶聯，隻需要一步免疫組化反應便完成染色的方法。這種方法避免了二抗的非特異性染色，減少了幹擾。但是由於(yu) 一抗與(yu) 生物素的結合，很有可能會(hui) 破壞了一抗的空間結構，尤其是抗體(ti) 抗原結合位點，造成假陰性或假陽性。

8、TCR試驗當中經常會碰到的問題有哪些？

• 假陽性/假陰性

• 脫片

• 非特異性染色

• 邊緣效應

• “陰陽臉”

• 。。。

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