業(ye) 務谘詢
中國:
Email: marketing@boboandtiantian.com
業(ye) 務谘詢專(zhuan) 線:400-780-8018
(僅(jin) 限服務谘詢,其他事宜請撥打川沙總部電話)
川沙總部電話: +86 (21) 5859-1500
海外:
+1(781)535-1428(U.S.)
0044 7790 816 954 (Europe)
Email:marketing@medicilon.com
抗體(ti) 的製備服務
根據製備的原理和方法,抗體(ti) 製備服務可分為(wei) 三類:多克隆抗體(ti) 、單克隆抗體(ti) 、基因工程抗體(ti) 。
:必威betway网址多克隆抗體(ti) 製備服務擁有專(zhuan) 業(ye) 的抗體(ti) 製備人員、先進的抗體(ti) 製備生產(chan) 儀(yi) 器、引進先進的製備技術,必威betway网址根據客戶需求專(zhuan) 業(ye) 打造製備方案,主要提供的動物選擇包括兔、小鼠、大鼠等。
:必威betway网址單克隆抗體(ti) 製備服務內(nei) 容 (1)免疫和ELISA檢測:客戶提供蛋白質或多肽與(yu) 載體(ti) 蛋白(如KLH)偶聯,需要約4mg蛋白質免疫源或5~10mg多肽,免疫5隻Balb/c小鼠,采血用ELISA進行檢測。 (2)融合和帥選:用小鼠脾細胞與(yu) 骨髓瘤細胞進行融合,得到的雜交瘤細胞通過增殖和ELISA篩選得到高效價(jia) 的克隆。(3)亞(ya) 克隆和交付結果:挑選兩(liang) 個(ge) 最好的克隆進行亞(ya) 克隆和亞(ya) 型鑒定,交付結果包括每個(ge) 克隆一瓶細胞核5ml培養(yang) 上清。
:研究成功的基因工程抗體(ti) 有:嵌合抗體(ti) 、重構抗體(ti) 、小分子抗體(ti) 等。
聯係我們(men)
Email:marketing@boboandtiantian.com
電話:021-58591500
網站:www.boboandtiantian.com
一、多克隆抗體(ti) 製備服務
大多數天然抗原物質(如細菌或其分泌的外毒素以及各種組織成分等)往往具有多種不同的抗原決(jue) 定簇,而每一決(jue) 定簇都可刺激機體(ti) 產(chan) 生一種特異性抗體(ti) 。
多克隆抗體(ti) 是多個(ge) 抗原決(jue) 定簇刺激機體(ti) 後,由多個(ge) 免疫淋巴細胞分泌的多種抗體(ti) 的混合物。
多克隆抗體(ti) 的製備方法
由於(yu) 這種抗體(ti) 是不均一的,無論是對抗體(ti) 分子結構與(yu) 功能的研究或是臨(lin) 床應用都受到很大限製,因此稱為(wei) 第一代抗體(ti) ;
二、單克隆抗體(ti) 製備
在機體(ti) 淋巴組織內(nei) 可存在千百種抗體(ti) 形成細胞(即B細胞),每種抗體(ti) 形成細胞隻識別其相應的抗原決(jue) 定簇,當受抗原刺激後可增殖分化為(wei) 一種細胞群,這種由單一細胞增殖形成的細胞群體(ti) 可稱為(wei) 細胞克隆(clone)。
同一克隆的B細胞可合成和分泌在理化性質、分子結構、遺傳(chuan) 標記以及生物學特性等方麵都是完全相同的均一性抗體(ti) ,亦可稱之為(wei) 單克隆抗體(ti) 。單克隆抗體(ti) 為(wei) 隻針對某一特定的抗原決(jue) 定簇,純度高的抗體(ti) ,因此稱為(wei) 第二代抗體(ti) 。
1、優(you) 點
(1)製備時不需純化抗原就可得到純抗體(ti) ; (2)有很高的效價(jia)
(3)有高度的單一性、均一性; (4)產(chan) 量高,且可連續生產(chan)
2、單克隆抗體(ti) 製備基本原理
體(ti) 內(nei) 免疫法很難獲得單克隆抗體(ti) ,如能將所需要的抗體(ti) 形成細胞選出,並能在體(ti) 外進行培養(yang) ,就可以獲得已知特異的單克隆抗體(ti) 。
雜交瘤細胞:既具有骨髓瘤細胞能大量無限生長繁殖的特性,又具有抗體(ti) 形成細胞合成和分泌抗體(ti) 的能力。這種抗體(ti) 是由識別一種抗原決(jue) 定簇的細胞克隆所產(chan) 生的均一性抗體(ti) ,故稱之為(wei) 單克隆抗體(ti) 。
應用雜交瘤技術可獲得幾乎所有抗原的單克隆抗體(ti) ,隻要這種抗原能引起小鼠的抗體(ti) 應答。
(1)DNA合成
① 主要途徑:參考生物化學,可被氨基喋呤(A)所阻斷
② 旁路途徑:利用次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)合成DNA;
所需要的酶為(wei) 次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸腺嘧啶核苷激酶(TK)。
(2)骨髓瘤細胞:來源於(yu) BABC/ c小鼠的骨髓瘤細胞係;沒有合成抗體(ti) 的能力;體(ti) 外具有無限生長繁殖的能力;喪(sang) 失合成HGPRT和TK的能力;隻能通過主要途徑合成DNA;在含有次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A) 、胸腺嘧啶核苷(T)的HAT培養(yang) 基中不能生長。
(3)免疫淋巴細胞:通常來源於(yu) BALB/c小鼠的脾淋巴細胞;具有合成抗體(ti) 的能力;具有合成HGPRT和TK的能力;能通過主要途徑和旁路途徑合成DNA;HAT培養(yang) 基中能生長,但短壽,隻能存活幾天,體(ti) 外不具有無限生長繁殖的能力
(4)融合劑:Kohler和Milstein最早仙台病毒;後來發現聚乙二醇(PEG)的融合效果更好,且避免了病毒的汙染問題。
(5)雜交瘤細胞:具有合成抗體(ti) 的能力(從(cong) 免疫淋巴細胞獲得);具有合成HGPRT和TK的能力(從(cong) 免疫淋巴細胞獲得);能通過主要途徑和旁路途徑合成DNA;HAT培養(yang) 基中能生長;體(ti) 外具有無限生長繁殖的能力(從(cong) 骨髓瘤細胞獲得)。
(6)飼養(yang) 細胞:單個(ge) 或少數細胞在體(ti) 外培養(yang) 很難成活,必需加入其他細胞以增加細胞密度,維持其代謝,使之成活繁殖;被加入的這種細胞稱為(wei) “飼養(yang) 細胞”。最常用的小鼠腹腔巨噬細胞。
3、單克隆抗體(ti) 製備過程:
製備抗原 → 免疫動物 → 免疫脾細胞和骨髓瘤細胞的製備 → 細胞融合 → 雜交瘤細胞的選擇培養(yang) → 雜交瘤細胞的的篩選
→ 雜交瘤細胞的克隆化 → 單克隆抗體(ti) 的檢定 → 雜交瘤細胞係的建立 → 單克隆抗體(ti) 的大量製備(動物體(ti) 內(nei) 誘生法和體(ti) 外培養(yang) 法)
4、單克隆抗體(ti) 的應用
(1)診斷試劑:用於(yu) 各種病原體(ti) 以及腫瘤的診斷。
(2)治療試劑:獸(shou) 醫臨(lin) 床上傳(chuan) 染病的治療;醫學臨(lin) 床上抑製器官移植排斥、治療自身免疫疾病、製備生物導彈。
(3)檢測試劑:各種病原體(ti) 毒力因子的檢測;各種免疫細胞及其它組織細胞表麵分子的檢測。
三、基因工程抗體(ti) (genetically engineering antibody)
自1975年單克隆抗體(ti) 雜交瘤技術問世以來,單克隆抗體(ti) 在醫學中被廣泛地應用於(yu) 疾病的診斷及治療。但目前絕大數單克隆抗體(ti) 是鼠源的,臨(lin) 床重複給藥時體(ti) 內(nei) 產(chan) 生抗鼠抗體(ti) ,使臨(lin) 床療效減弱或消失。因此,醫學臨(lin) 床上最理想的單克隆抗體(ti) 應是人源的,但人-人雜交瘤技術目前尚未突破。
目前較好的解決(jue) 辦法是能研製基因工程抗體(ti) ,以代替鼠源單克隆抗體(ti) 用於(yu) 臨(lin) 床。基因工程抗體(ti) 興(xing) 起於(yu) 80年代早期,是利用DNA重組技術,在分子水平對抗體(ti) 基因進行切割、拚接或修飾,或人工合成後導入受體(ti) 細胞表達,從(cong) 而產(chan) 生的新型抗體(ti) ,也稱為(wei) 第三代抗體(ti) 。
研究成功的基因工程抗體(ti) 有:嵌合抗體(ti) 、重構抗體(ti) 、小分子抗體(ti) 等。